本发明涉及一种同时提高人参不定根中多种人参皂苷含量的培养方法，该方法在不定根中期培育时采用SH培养基在低温下进行液体悬浮培养；在不定根培育时：利用生物反应器采用SH培养基培养，所述SH培养基包括3/4SH、3％蔗糖、5PPM IBA、3.5N的NaOH 1mL；培养时，开启空气阀，控制通气量为0.3‑0.6vvm，温度23‑25℃，湿度30‑50％，培养3周；之后打开臭氧阀，通入空气与臭氧的混合气体，通气量为0.3‑0.6vvm，臭氧浓度为0.15‑0.2mg/m3，温度23‑25℃，湿度30‑50％，培养1周。该方法在人参不定根培养过程中通过两种诱导子分步进行诱导，既能提高PPT皂苷（Rg1、Re）的含量，同时还能显著提高PPD皂苷（Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd）的含量以及稀有人参皂苷（Rg3、Rh2）的含量。