本发明公开了一种抗猪瘟病毒E2单克隆抗体、其制备方法及用途。所述单克隆抗体包括重链可变区和轻链可变区，重链可变区的CDR1的氨基酸序列如序列1所示；重链可变区的CDR2的氨基酸序列如序列2所示；重链可变区的CDR3的氨基酸序列如序列3所示；轻链可变区的CDR1的氨基酸序列如序列4所示；轻链可变区的CDR2的氨基酸序列如序列5所示；轻链可变区的CDR3的氨基酸序列如序列6所示。本发明所述的单克隆抗体能特异性与猪瘟病毒E2蛋白结合，具有很好的抗原结合活性和一定的病毒中和活性，既可用于猪瘟的检测诊断又可以用于预防治疗，在开发猪瘟病毒新型诊断试剂和治疗药物中具有较好的生产应用前景。