本发明属于中药检测技术领域，公开了一种具有改善睡眠功能的中药组合物的检测方法，包括用薄层色谱法鉴别灵芝、首乌藤和酸枣仁及用高效液相色谱法测定斯皮诺素的含量，所述方法对灵芝及首乌藤采用相同的前处理方法，并选择特定的展开剂体系，使灵芝及首乌藤中的各种成分均能很好地分离，实现了两种药材的同时鉴别；各自供试品色谱中，在与阳性对照品色谱对应的位置上，显示相同颜色的斑点，而阴性对照品色谱中均无干扰斑点，表明本发明的方法具有较强的专属性。同时，本发明的方法简化了操作过程，减少了鉴别所需时间，提高了工作效率，降低了检测成本，同时也为中药组合物中各成分的薄层色谱法鉴别提供了新思路，有利于中药质量控制标准的提高。