本发明涉及中药分析技术领域，特别涉及中药制剂中雷公藤甲素含量的测定方法。所述测定方法包括以下步骤：取雷公藤甲素标准品，配制标准溶液；将待测中药制剂样品浸于70℃～90℃的水中，然后加入乙酸乙酯，超声提取，收集有机相，向所述有机相中加入碱液萃取，去除水相，制备待测溶液；对所述标准溶液和所述待测溶液进行高效液相色谱联用质谱检测；所述质谱条件包括：扫描模式为单离子监测扫描；所述待测中药制剂样品的制备原料包括昆明山海棠、淫羊藿、菟丝子和枸杞子。本发明所述方法前处理方法简单，能够排除中药制剂中大极性成分及小极性成分（例如黄酮类成分）的干扰，而且测定结果稳定，符合毒/效成分精准控制的原则。