本发明涉及一种食品中酪蛋白磷酸肽的检测方法。其包括以下步骤：标准品的制备：以90％CPP为标准品I，加溶剂溶解，制备标准品溶液I；以20％CPP为标准品II，加溶剂溶解，制备标准品溶液II；试样前处理：向浓度为0.05g/mL‑0.1g/mL的试样的水溶液中，滴入体积浓度为40％‑60％的盐酸水溶液至产生沉淀，加水定容，离心，过滤，得试样溶液；测定：对所述试样溶液进行超高效液相色谱联用质谱检测，外标法定量；色谱条件包括有：色谱柱：C18130A色谱柱；流动相C为甲酸水溶液，流动相D为乙腈；梯度洗脱。上述检测方法可避免其他蛋白质、维生素等营养素对CPP检测结果的干扰，稳定、准确地检出食品中不同规格的CPP。