本发明涉及生物催化技术领域，公开了一种利用生物酶促进木材制浆预水解液中木质素聚积的方法，具体步骤为：利用锰过氧化物酶处理木材制浆预水解液；将经锰过氧化物酶处理后的水解液调节至酸性，再利用离心或沉淀或过滤方式分离沉淀物，并将沉淀物利用酸化去离子水洗涤多次，得到纯化的木质素。本发明利用锰过氧化物酶的催化作用，对预水解液中的木质素进行了生物改性，提高了木质素的分子量使其聚合并沉积，便于后续提取木质素，方法简单，有利于促进木质素的分离与高值化利用。