本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种源于巴马长寿村的鼠李糖乳杆菌hsryfm 1301的标志引物对。本发明还公开了一种鉴定鼠李糖乳杆菌hsryfm 1301的方法。本发明又公开了上述鉴定方法在发酵制品中鼠李糖乳杆菌hsryfm 1301存在验证中的应用。本发明又公开了上述鉴定方法在粪便中鼠李糖乳杆菌hsryfm 1301存在验证中的应用。本发明又公开了上述鉴定方法在鼠李糖乳杆菌同种异株混合培养物的菌株计数中的应用。本发明设计的引物对能够从鼠李糖乳杆菌hsryfm 1301扩增到稳定条带，并组成特异性图谱，且扩增能力稳定，可以作为鼠李糖乳杆菌hsryfm 1301菌株的标志引物。