本发明公开了川蛭通络胶囊HPLC标准指纹图谱的建立方法及其在检测川蛭通络胶囊质量的应用，包括对照品溶液制备、供试品溶液制备、HPLC测定、标准指纹图谱建立以及样品检测等步骤。本发明方法操作简便、稳定性高、重现性好，所得川蛭通络胶囊HPLC标准指纹图谱，具有28个特征峰，能有效表征和控制川蛭通络胶囊的质量，有利于稳定产品质量，确保其内在质量的均一和稳定，保证临床用药的安全性和有效性。