本发明公开了一种采用反相液相色谱法检测盐酸托莫西汀对映异构体的方法，属药物分析领域，该方法采用硅胶表面涂敷有纤维素‑三（4‑甲基苯甲酸酯）为填料的多糖衍生物反相涂敷型手性色谱柱，以六氟磷酸钾溶液和乙腈混合溶液为流动相，柱温为25～35℃，流速为0.5～0.8ml/min，采用紫外检测器，波长为200～250nm。本发明可直接有效的分离盐酸托莫西汀与对映异构体，检测结果准确性好、灵敏度高，较现有的正相色谱法或者柱前衍生反向色谱法操作更简便、成本更低，分析时间更短，从而为盐酸托莫西汀及其制剂的质量控制提供了较好的保障。