本发明涉及一种萘敏维滴眼液有关物质的检测方法，该方法为高效液相色谱法；检测方法包括如下步骤：a.辛烷磺酸钠溶液的制备；b.流动相的制备；c.供试品溶液的制备；d.0.5％对照溶液的制备；e.系统适用性溶液的制备；f.以流动相作为空白溶液，采用高效液相色谱法对上述供试品溶液、0.5％对照溶液、系统适用性溶液进行检测，记录色谱图；本发明提供了一种重现性、灵敏度、准确度、分离度均能符合要求的萘敏维滴眼液有关物质的检测方法。