一种CHO细胞内源性冷诱导RNA-结合蛋白启动子核心序列及其应用

授权公布号：CN113969280B

有效

申请

2020-07-22

申请公布

2022-01-25

授权

2023-08-29

预估到期

2040-07-22

申请号	CN202010708371.0
申请日	2020-07-22
申请公布号	CN113969280A
申请公布日	2022-01-25
授权公布号	CN113969280B
授权公告日	2023-08-29
分类号	C12N15/113;C12N15/10;C12N15/70
分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
申请人名称	珠海联邦制药股份有限公司
申请人地址	广东省珠海市金湾区三灶镇安基路2428号

专利法律状态

2023-08-29 授权

状态信息

授权

2022-02-15 实质审查的生效

状态信息

实质审查的生效；IPC(主分类):C12N15/113；申请日:20200722

2022-01-25 公布

状态信息

公布

摘要

本发明公开一种CHO细胞内源性冷诱导RNA‑结合蛋白启动子核心序列及其应用。该核心序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过生物信息学方法分析了CIRP基因翻译起始位点上游1500bp的DNA序列，选择置信度较高的基因片区作为假想启动子；设计引物，从CHO细胞基因组中分别克隆获得目标基因序列，再亚克隆入适合的载体中使其驱动目的基因在CHO细胞中表达，比较在37℃和32℃温度条件下不同启动子的活性，获得最优启动子序列，分析其元件组成，获得核心序列。具有该核心序列的启动子在亚生理低温条件下培养48小时后表达强度分别为CMV启动子的0.8倍和1.2倍，是37℃条件下表达强度的4.5倍和4.6倍。