一种敲除GS基因的CHO细胞株及其制备方法与应用

授权公布号：CN110343668B

有效

申请

2019-07-23

申请公布

2019-10-18

授权

2021-11-19

预估到期

2039-07-23

申请号	CN201910668173.3
申请日	2019-07-23
申请公布号	CN110343668A
申请公布日	2019-10-18
授权公布号	CN110343668B
授权公告日	2021-11-19
分类号	C12N5/10;C12N15/90;C12N9/22
分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
申请人名称	珠海联邦制药股份有限公司
申请人地址	广东省珠海市国家高新技术产业开发区三灶科技工业园

专利法律状态

2021-11-19 授权

状态信息

授权

2019-11-12 实质审查的生效

状态信息

实质审查的生效；IPC(主分类):C12N5/10；申请日:20190723

2019-10-18 公布

状态信息

公布

摘要

本发明公开了一种敲除GS基因的CHO细胞株及其制备方法与应用。该CHO细胞株无GS蛋白表达且无嘌呤霉素抗性、无Cas9基因及sgRNA序列整合入细胞基因组中。本发明利用CRISPR/Cas9方法敲除GS基因，通过优化筛选方法，得到该CHO细胞株。本发明提供的制备方法能快速实现CHO细胞GS‑/‑编辑，筛选出GS基因敲除且无嘌呤霉素抗性、无Cas9基因及sgRNA序列整合的CHO GS‑/‑细胞株。该细胞株应用于重组蛋白表达，无需MSX介导的基因扩增过程，大大加快了高产细胞株筛选效率。