本发明公开了一种天然植物抗菌洗手液的制备方法。包括如下步骤：取鱼腥草、甘草，加入正己烷，搅拌均匀，加热回流提取，得到提取液；将提取液抽滤，得到抽滤液；将抽滤液与稀硫酸进行混合均匀，萃取后，取水相；将水相减压浓缩、结晶、过滤分离，得到粗提物；将粗提物与乙酸乙酯倒入萃取二氧化碳超临界萃取装置中进行萃取，得到精制提取物；将精制提取物减压蒸馏至干，得到固体物，再将固体物与聚乙烯吡咯烷酮、甘油、药用乙醇混合均匀，即得。本发明提供的抗菌洗手液利用天然植物，利用稀硫酸的反萃取，提高了提出物的纯度，减少了洗手液的浊度，利用反二氧化碳超超临界萃取进一步地提高了产物的纯度，提高了灭菌效果。