本发明提供了醋甲唑胺未知杂质及其制备、分析方法和应用，属于有机合成药物化学领域。本发明首次公开了两种醋甲唑胺中新杂质化合物及其制备、分析方法，所述制备方法制备的杂质样品纯度高，操作简单高效，反应条件较适中，安全性强，易于控制，适用于杂质制备作为对照品，以监控产品质量。