本发明提供一种鸭2型腺病毒、鹅细小病毒病、番鸭细小病毒病三联灭活疫苗，其中鸭2型腺病毒病为灭活后的GD株病毒，番鸭源鹅细小病毒为灭活后的GPV‑FJ株病毒,保藏编号为CCTCC NO:V201811；番鸭细小病毒为灭活后的MDPV‑GDL株病毒，保藏编号为CCTCC NO:V201812。本发明制备的鸭2型腺病毒、鹅细小病毒病、番鸭细小病毒三联灭活疫苗安全性良好，未出现由疫苗引起的任何局部和全身不良反应。保存期试验中经过性状、安全性试验、效力试验数据的分析，各项指标均稳定有效；利用血清学方法和免疫攻毒法评估疫苗的免疫效果，结果显示，本发明中制备的三联灭活疫苗对鸭群能够提供有效的免疫保护，具有很好的商品化开发前景。