本实用新型涉及一种细胞培养瓶的瓶塞固定装置。具体地，本实用新型提供一种细胞培养瓶的瓶塞固定装置，所述的装置包括第一半圆卡箍、第二半圆卡箍、第一扁平杆、第二扁平杆、第三扁平杆、第四扁平杆、第五扁平杆、第一螺丝、第二螺丝、第三螺丝、第四螺丝。本实用新型所述的细胞培养瓶的瓶塞固定装置能够将瓶塞与细胞培养瓶的瓶口牢固固定，从而防止灭菌后瓶塞松弛，从而保证灭菌效果。