本发明提供了一种犬干扰素的制备方法，该方法通过培养携带犬干扰素基因的重组质粒的大肠杆菌获得种子液，并以一定浓度接种菌液，然后经低温诱导获得发酵菌液，发酵菌液经离心收菌体，菌体经破碎离心收获包涵体，包涵体经洗涤、重悬、低温静水压复性和层析纯化后获得犬干扰素，该方法的优势在于采用低温诱导结合低温静水压复性提高包涵体复性率和蛋白活性。