本发明提供了一种鸡传染性支气管炎二价疫苗效力检验方法，同时提供了尤其适用于该方法的两株单克隆抗体细胞株。本发明在检测前先对二价疫苗中的抗原进行中和，得到仅含有一种抗原的待测样品再进行检测，从而避免了多抗原存在对检验结果所产生的交叉影响。与此同时，选择更加客观的定量分析方法并优化了相关工艺条件。本发明所提供的两株杂交瘤细胞性能优异，均具有与自身特异反应强、与另一抗原无交叉反应的特性，可以较好的将两株病毒区分开，尤其适用于本发明所述检测方法。