本发明涉及一种PCV2病毒样颗粒夹心定量ELISA检测法及其应用。利用猪圆环病毒2型PCV2d VLPs免疫小鼠，筛选杂交瘤细胞，制备的抗体可以特异性识别PCV2（PCV2b、PCV2d均可识别），可用于WB、IFA等PCV2相关检测；利用该抗体包被ELISA检测时发现不与Cap蛋白发生反应，能够用于区分VLPs和Cap。基于该单克隆抗体经过一系列反应条件的优化建立了夹心ELISA，可用于PCV2 VLPs的特异性定量以及定性，检测最低浓度可达到62.5ng/ml，灵敏度高，相关系数R2为0.992，定量准确性好，适用于PCV2b与PCV2d VLPs的定量，可应用于PCV2不同基因型VLPs的定量、组装效率鉴定以及PCV2病毒侵染鉴定。