一种抗肿瘤活性高的灵芝多糖的制备方法，其特征在于它的制作步骤为：1）将灵芝原药材粉碎成10~30目灵芝颗粒，2）将粉碎后的灵芝颗粒投入高压超临界萃取装置的萃取罐中，密封，打开高压泵通CO2，升压至600~2000bar，温度40~60℃，静态萃取30~60min，打开微调阀门，动态萃取，分离罐压力80~120bar，温度30~50℃，控制CO2流量10~16kg/h条件下，循环萃取2~4h；3）水萃取：CO2萃取结束后，向萃取罐加水，加温到70~80℃，通入CO2升压到80~100bar，保压萃取1.5~3h，真空浓缩、冷冻干燥得到浅棕色的灵芝多糖。本发明萃取分离方法简单，适宜于工业化生产，所得灵芝多糖萃取物具有强的抗肿瘤活性。