一种对胃黏膜有保护作用的灵芝孢子油，它是由超临界二氧化碳双重萃取技术提取灵芝孢子粉而得到的，灵芝孢子油酸价≤2 KOH（mg/g），过氧化值≤0.1%。第一次萃取使用超临界二氧化碳萃取技术提取灵芝孢子粉得到灵芝孢子原油，第二次萃取为使用第一次萃取提到的灵芝孢子原油再使用超临界二氧化碳萃取技术纯化灵芝孢子原油得到灵芝孢子油。灵芝孢子油具有保护胃黏膜的作用，可显著降低乙醇和消炎痛等胃黏膜损伤剂导致的胃黏膜损伤溃疡、出血，并延缓乙醇效应的出现时间。灵芝孢子油质量稳定，将其作为食品、保健食品或药品的原料时，可使产品具有保护胃黏膜、防治胃黏膜损伤溃疡、出血的功效，本发明可在线进行超临界双重萃取纯化分离。