本发明公开了一种负载活性氧的细菌纤维素敷料及其制备方法，分别使用酸性溶液和碱性溶液处理细菌纤维素膜，漂洗；然后浸入包含过氧化氢、过氧化氢保护剂和抗菌剂的活性溶液中，取出、分切包装。本发明制备获得的细菌纤维素敷料为湿性敷料产品，不仅可以轻松的贴敷于创面，而且贴敷料于创面可长达7天。即使在高温、辐照灭菌下，过氧化氢分解速率大大下降，使得敷料可持续输送ROS，降低创面感染，促进创面愈合。