本发明属于冠突散囊菌培养领域，具体公开了一种用于冠突散囊菌分生孢子纯化培养的培养基及其制备方法和应用，所述培养基包含以下重量份的成分：葡萄糖6‑10g/L、蛋白胨2‑8g/L、磷酸二氢钾1‑3g/L、七水硫酸镁0.5‑1.5g/L、氯化钙0.5‑1.5g/L、氯化钠20‑40g/L，进一步的，制备成固体培养基，还包括10‑20g/L的琼脂和1‑2μg/ml氯霉素；本发明的培养基可用于冠突散囊菌分生孢子的纯化培养，茯砖生产过程中接种纯化后的分生孢子，不带其他杂菌，做出的茯砖茶口感更纯，同时由于分生孢子壁较厚，使用分生孢子纯化的菌落，其耐高温能力更强，有利于茯砖接种生产工艺中高温汽蒸时，冠突散囊菌能更好存活。