本发明涉及兽用生物制品领域，更具体地，公开了三种O型口蹄疫病毒样颗粒以及抗O型口蹄疫的疫苗组合物及其制备方法。本发明筛选的毒株序列制备的病毒样颗粒对于我国流行的O型口蹄疫SEA型、CATHAY型及其变异株有着较好的免疫应答能力，以此制备的疫苗组合物能有效防治三种亚型口蹄疫的感染，是一种新型疫苗。