本发明属于生物技术领域，公开了一种生产琥珀酸的方法，其包括如下步骤：将解脂酵母菌种子液接入到含有发酵培养基的发酵罐中进行发酵，发酵时间为24‑48h，然后接入莱茵衣藻，同时添加营养液，继续发酵培养36h，停止发酵，将发酵罐与陶瓷膜偶联，将发酵罐中的发酵液经由陶瓷膜分离，得到滤液和微生物；将所得滤液离心，收集上清液，然后经过H‑型强酸性阳离子交换树脂，收集通过液，减压蒸发，浓缩至原体积的三分之一，然后将浓缩液冷却至8℃，静置24h，使琥珀酸结晶析出，分离晶体和母液，收集晶体，最后干燥，得到琥珀酸产品。本发明方法操作工艺简单，条件温和，应用前景广阔。