本发明涉及药物质量检测技术领域，具体公开了一种巴柳氮钠胶囊中有关物质的高效液相色谱分析方法。该法采用C18色谱柱，以水作为稀释剂配制待测样品，用紫外检测器进行液相色谱定量分析。其色谱条件为：柱温40~50℃，检测波长235~245nm，流速0.8~1.2mL/min，以pH值为6.5~7.5的醋酸铵溶液作为流动相A，以乙腈作为流动相B，建立梯度洗脱程序，其中醋酸铵溶液的浓度为0.02mol/L~0.05mol/L，pH调节剂为氨溶液。本法与美国药典及现行的国内标准相比，增加了对关键杂质联苯偶氮水杨酸的研究，可检测的杂质个数多，峰型好，分离度高，提高了杂质检测的准确性和产品的质量可控性。