本发明公开了一种式V所示的乐平霉素的制备方法及其中间体，以天维菌素为起始原料，分别经过酸水解反应，5位羟基上保护基，然后与2‑甲氧亚氨基苯乙酸经过SN2反应，最后脱除5位羟基保护基得到式V化合物。本发明具有成本低，纯度高，收率高和适合工业化生产的优点。