本实用新型公开一种检测蛋白质乙酰化水平的蛋白芯片及试剂盒，可以检测蛋白质翻译后乙酰化水平，所述蛋白芯片包括基片和阵列式分布于基片上的捕获抗体，所述基片为包被有琼脂糖膜三维材料的玻璃基片，该基片的蛋白固定效率高，且性能稳定，所述捕获抗体包括至少68种特异性抗体。所述试剂盒包含蛋白芯片，还包括抗乙酰化信号检测试剂及蛋白收集和标记试剂。使用本实用新型的蛋白芯片及试剂盒，蛋白固定效率高，且性能稳定，并可以同时检测样品中多个蛋白质翻译后乙酰化修饰水平。