本发明涉及一种对含有核酸的样本中DNA与RNA同时定量的试剂盒、方法及质控方法，属于分子生物学领域。本发明的试剂盒中，核酸包含管家基因，管家基因包含第一内含子和与第一内含子相邻的两个外显子，两个外显子分别为第一外显子和第二外显子；试剂盒包含能够特异性退火至第一外显子和第二外显子的核酸序列的扩增引物、可与第一内含子杂交的第一杂交探针以及可与第一外显子或第二外显子杂交的第二杂交探针，第一杂交探针和第二杂交探针上带有不同的标记物。本发明还将DNA与RNA同时定量的测量值与高通量测序检测值进行质控比较，提供了DNA与RNA品质的双质控方法，该方法适用于快速方便地评估样本品质是否适合进行操作及成本都要求较高的高通量测序基因检测。