本发明涉及一种对目标区域基因突变进行富集和检测的方法。该富集方法包括：将含有待检测目标区域的核酸样本和第一引物、第二引物、阻滞扩增序列混合，进行第一PCR扩增获得第一扩增产物；基于第一扩增产物利用第一引物和第二引物进行第二PCR扩增获得第二扩增产物；阻滞扩增序列的3’末端含有阻滞基团，阻滞扩增序列和第一引物含有部分重叠序列，待检测目标区域位于阻滞扩增序列与核酸样本的匹配区域内，第一引物的3’末端位于待检测目标区域的上游，阻滞扩增序列与核酸样本之间存在至少一个碱基不匹配位点，所述至少一个碱基不匹配位点不同于待检测目标区域位点。由此可以实现对于低频基因突变的高精度检测。