本发明公开了一种用于子宫内膜癌早期筛查的人外周血循环肿瘤DNA中TMEM101基因甲基化检测试剂盒，应用于子宫内膜癌的早期筛查，试剂盒中包括：TMEM101基因目的位点的甲基化特异引物；TMEM101基因特异的水解探针；内参基因的引物和内参基因的水解探针；所述TMEM101基因目的位点为TMEM101基因转录起始位点上下游2000bp的区间中的至少一个CpG位点；所述内参基因为GAPDH和β‑actin中的一种或者多种；所述试剂盒包括PCR预扩增反应体系和PCR扩增反应体系。本发明克服了现有技术过程繁琐，检测时间长，假阳性高，子宫内膜癌血液早期筛查无法溯源等技术上的不足，提供一种用于子宫内膜癌早期筛查的人外周血循环肿瘤DNA中TMEM101基因甲基化检测的试剂盒。