利用CRISPR/Cas12a系统靶向富集核酸目标区域的方法及其应用

授权公布号：CN113355389B

有效

申请

2020-03-05

申请公布

2021-09-07

授权

2022-11-15

预估到期

2040-03-05

申请号	CN202010146552.9
申请日	2020-03-05
申请公布号	CN113355389A
申请公布日	2021-09-07
授权公布号	CN113355389B
授权公告日	2022-11-15
分类号	C12Q1/6806;C40B50/06;C12Q1/6869;GB201916379D0,2019.12.25;AU2018383712A1,2020.07.02;US2021301269A1,2021.09.30AndrewVAnzalone等.Search-and-replacegenomeeditingwithoutdouble-strandbreaksordonorDNA.《Nature》.2019,第576卷(第7785期),第149-157页.;杜秋丽等.植物基因组编辑新工具——引导编辑技术
分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
申请人名称	广西扬翔股份有限公司
申请人地址	广西壮族自治区贵港市江南工业园区城东大道与工业一路交汇处东北角

专利法律状态

2022-11-15 授权

状态信息

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2021-09-07 公布

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公布

摘要

本发明涉及一种利用CRISPR/Cas12a系统靶向富集核酸目标区域的方法及其应用。该方法包括（1）设计第一和第二RNA，第一RNA除第一sgRNA分子，还含有第一互补序列，第二RNA除第二sgRNA分子，还含有第二互补序列，第一sgRNA分子和第一互补序列与目标区域上游互补，第二sgRNA分子和第二互补序列与目标区域下游互补；（2）与Cas12a蛋白混合获得复合物；（3）将复合物、核酸、逆转录酶、变性剂和dNTP混合孵育和变性，获得变性产物；（4）去除RNA和蛋白质，扩增获得富集产物。由此可简便、快捷实现目标区域的富集，应用于测序领域。