本申请公开了一种用于癌症样本miRNA测序定量结果评价的试剂及其制备方法和应用。本申请的试剂包括SEQ ID NO.1至SEQ ID NO.8所示序列的RNA中的至少一种。本申请的试剂，将其定量的加入待测RNA样品中，并通过测序定量分析所加入的试剂的量，将定量分析结果与实际加入量进行比较，以此评价整个miRNA测序定量结果的准确性和可靠性；该方法简便、易用，能够有效的评价miRNA测序定量结果的可信度。本申请的试剂各方面特性都与真实的miRNA十分接近，因此，采用本申请的试剂能够更真实、准确、可靠的反映人源miRNA测序定量结果的实际情况，从而对癌症样本miRNA测序定量结果作出更准确、可靠的评价。