本发明涉及一种NK细胞无血清培养液及NK细胞的培养方法，该无血清培养液包括基础培养液、促生长组分、酶抑制剂、微量元素和微支撑体，在该培养液中不含牛血清白蛋白，在培养NK细胞之后，纯化过程简单，并且避免动物蛋白引起人体免疫反应；同时在无血清培养液中具有微支撑体，且具有促进贴壁生长的昆布氨酸和多聚赖氨酸，能够提高NK细胞的扩增速度；在培养基中加入微量元素锌能够提高抗体表达量，也可以抑制细胞的凋亡；铜也可以提高抗体表达量。本发明的培养液能够实现对NK细胞培养的高效培养，并且能够提高NK细胞对肿瘤的杀伤能力。