本发明提供一种C肽免疫原，包括第一完全抗原和第二完全抗原，其中第一完全抗原为C肽N端氨基酸序列与载体蛋白偶联而得，第二完全抗原为C肽C端氨基酸序列与载体蛋白偶联而得；第一完全抗原的C肽N端氨基酸序列为C肽全长序列中的1‑12位序列，第二完全抗原的C肽C端氨基酸序列为C肽全长序列中的18‑31位序列。通过现有的合成方法即可获得抗原，并且为可用的完全抗原，制备方法简单，得到的完全抗原结构稳定；而由此通过动物免疫得到的单克隆抗体对能够分别特异性结合C肽的N端及C端，结合位点距离较远，因此不会因为空间位阻导致无法配对的情况出现，可以满足开发C肽磁微粒化学发光免疫诊断试剂及其它免疫学诊断试剂对抗体的需求。