本发明涉及兽用制品技术领域，尤其涉及一种牛轮状病毒无血清悬浮培养方法及其产品和应用。本发明所述牛轮状病毒无血清悬浮培养方法以猪小肠黏膜上皮细胞为宿主细胞，接毒培养，得到牛轮状病毒培养液。市面上对于牛轮状病毒敏感的细胞种类非常较少，大部分仅局限于贴壁细胞培养。本发明偶然发现，猪小肠黏膜上皮细胞具有无血清悬浮培养潜力，经常规无血清悬浮培养驯化后，能稳定连续增殖，且在牛轮状病毒的培养中表现出特殊优势：无需添加血清，即可稳定培养获得高效价BRV病毒培养液。且利用获得的病毒培养液制备得到的灭活疫苗免疫原性良好，能够有效的预防由牛轮状病毒引起的犊牛腹泻。