本发明提供了一种电子介体的合成方法、生物传感器及其制备方法，所述电子介体的合成方法包括：合成第一中间体：将1,10‑菲咯啉衍生物与溴化钾混合反应，得第一中间体；合成第二中间体：将第一中间体与聚乙烯亚胺混合反应，得第二中间体；合成过渡金属聚合物电子介体：将过渡金属氯化物和吡啶羧酸或者吡啶二甲酸同系物混合反应，得过渡金属聚合物电子介体。所述生物传感器含有上述合成方法合成的电子介体，其制备方法包括：配制电子介体溶液和氧化酶溶液、固定氧化酶溶液以及制备生物传感器。本发明的优点在于，将所述电子介体运用在生物传感器中，能够降低生物传感器的激励电压，提高其抗干扰性能，且所述生物传感器灵敏度高且稳定性强。