本实用新型涉及定位治具技术领域，尤其涉及一种显示屏定位治具。显示屏定位治具包括治具本体、第一定位柱和第二定位柱。治具本体上设有第一定位槽和第二定位槽，第二定位槽设于第一定位槽的内底壁，第一定位槽用于容纳电路板，第二定位槽用于容纳显示屏。第一定位槽内设有第一配合孔，第二定位槽内设有第二配合孔，第一定位柱与第一配合孔间隙配合，用于对电路板进行定位，第二定位柱与第二配合孔间隙配合，用于对显示屏进行定位。这样，在放置或拿取电路板和显示屏时，第一定位柱和第二定位柱均可具有一定的位移量，以缓冲电路板与第一定位柱、显示屏与第二定位柱之间的接触碰撞，避免电路板或显示屏被损坏。