本发明公开了一种生产D‑阿洛酮糖用枯草芽孢杆菌及其培养方法和应用，该枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）编号为blb‑12‑B，于2021年12月08日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.24054。本发明分离获得枯草芽孢杆菌，其发酵液中的D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶酶活≥550U/ml，大大提高酶转化的效率，显著降低生产成本，发酵获得的酶在pH5.5‑7.5时，酶活性高于85%，pH适应范围较广，能够降低料液的色值和电导率，更加有利于产品的后提纯工艺，提高产品的生产效率，显著降低D‑阿洛酮糖的生产成本，有益于工业化生产控制。