本实用新型是一种一次性无菌染色培养皿，在上盖和下盖内设置有上下端均开口的筒状培养皿本体，并在培养皿本体与下盖之间设置有密封膜。中间的培养皿本体可以使培养基形成上下两个平面。上平面和上盖之间形成的空间供微生物生长使用。将PE膜撕掉后，下平面用于染色。这样可以有效地将微生物生长和染色分开，从而避免了染色过程中的交叉污染问题。