本发明提供一种Bus_Off故障测试系统及测试方法，属于CAN总线故障检测领域。本发明测试系统包括电源开关、1个以上CAN节点、CAN总线报文监控设备、CAN总线干扰仪、防止信号反射模块及上位机，其中，电源开关接电源输出端，所述CAN节点、CAN总线报文监控设备、CAN总线干扰仪并联在双绞线上，所述上位机包括与CAN总线报文监控设备相连的上位机CANoe和与CAN总线干扰仪相连的上位机CANStress，所述防止信号反射模块包括两个结构相同的防止信号反射单元，所述防止信号反射单元分别设置在双绞线的两端。本发明电路搭建简单、稳定性强，能有效的测试出Bus_Off故障引起的一系列问题。