本申请涉及植物离体培养的技术领域，具体公开了一种心叶牛舌草Jack Frost的组织培养方法。具体包括以下步骤：外植体的获取和消毒、诱导外植体形成愈伤组织和不定芽、不定芽增殖以及诱导不定芽生根；其中，外植体的获取和消毒步骤中，外植体选取生长健壮且无病虫害的母株的新叶片；并提供了诱导外植体形成愈伤组织和不定芽、不定芽增殖、诱导不定芽生根中所用的培养基配方。本申请能够有效提高心叶牛舌草Jack Frost的繁殖效率，促进心叶牛舌草Jack Frost的应用。