一种分离测定沙库巴曲钙盐及其杂质的方法，具有以下步骤，1）取沙库巴曲钙盐，加稀释剂溶解，得到浓度为0.1‑10mg/ml的试样溶液；2）取步骤1）得到的试样溶液，加稀释剂稀释50‑1000倍，得到对照溶液；3）分别向高效液相色谱仪进样等体积的试样溶液和对照溶液，采用流动相A和流动相B作为流动相进行梯度洗脱，记录色谱图，完成试样溶液中杂质的分离测定。操作简单、方便，可有效实现沙库巴曲钙盐及其杂质、杂质与杂质之间的分离和测定，从而实现控制沙库巴曲钙盐及其产品质量的目的。