本发明涉及一种糖及糖醇类化合物的柱后衍生检测方法，涉及葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇等糖及糖醇类化合物的检测技术领域。本发明将糖或糖醇类物质采用高效液相色谱‑十八烷基硅胶色谱柱分离技术，将糖类进行分离纯化，再通过强氧化剂将其分子上的羟基经氧化转化为羰基，并与荧光传感化合物在一定温度、时间条件下发生衍生反应，生成含荧光显色基团的衍生化合物，最后采用荧光检测器实现快速定量定性检测的一种检测方法。采用此法测定糖及糖醇类化合物，数据稳定可靠，检测限可提高至ppm级。