本发明公开了一种用于BHK‑21细胞高密度悬浮培养的低血清培养基及其在口蹄疫病毒增殖培养中的应用。本发明通过研究BHK‑21细胞生长过程中葡萄糖等营养物质的代谢水平和相互调节，提出了个性化BHK‑21细胞低血清培养基，包含氨基酸部分、维生素部分、平衡盐部分和其它添加物部分。使用本发明培养基用于BHK‑21细胞的高密度悬浮培养，能够大大提高细胞对营养物质的有效利用率，降低代谢副产物浓度，从而提高细胞培养效能；此外，采用本发明培养基培养获得的BHK‑21细胞，对FMDV不同血清型敏感性增加，病毒有效抗原146S含量得到大幅度提高，可达到细胞生长的高效性、细胞生长的可控性及代谢副产物浓度最低化的目的，使生物制品的生产效率更高，生产成本更低，具有显著的经济效益。