本发明公开了一种用于规模化悬浮培养的抗凋亡MDCK宿主细胞株及其建立方法。本发明采用基因重组技术将可调节细胞凋亡的基因Bcl‑2通过真核表达载体导入MDCK细胞，建立了Bcl‑2过表达的MDCK抗凋亡宿主细胞株，将改造的MDCK细胞株使用低血清培养基悬浮培养，72h时活细胞密度达4.5×106cells/ml，细胞活率95％以上，较正常组细胞表达量提高了31％；同时跟踪Bcl‑2基因过表达的MDCK细胞株培养过程中细胞凋亡和细胞周期情况，结果显示较正常组细胞，改造后的MDCK细胞的凋亡率显著降低，活力显著提高。本发明的提出为生产优质的疫苗产品提供了高质量的宿主细胞。